Testele încrucișate: pentru ce sunt ele, tehnica și fundația, faze

Testele încrucișate reprezintă o serie de studii de laborator efectuate pentru a determina dacă produsele din sânge de la un donator (în principal, sânge integral și concentrat globular) sunt compatibile cu sângele destinatarului.

Acesta este un test complementar pe lângă compatibilitatea ABO și factorul Rh. Motivul pentru testarea încrucișată este că uneori două persoane (donator-primitor) pot avea același ABO și Rh grup, dar sângele lor este încă incompatibil.

O astfel de incompatibilitate se datorează prezenței anticorpilor împotriva unei serii de proteine de celule roșii din sânge cunoscute sub numele de antigene minore. Aceste antigene nu sunt evaluate în mod obișnuit, așa cum se face cu factorii de sânge (ABO) și Rh.

Acest lucru se datorează faptului că antigenele minore sunt mult mai puțin frecvente și au o expresie variabilă în fiecare individ, prin urmare este practic imposibil să le grupați în categorii așa cum se face cu grupul și factorul Rh.

În schimb, celulele roșii din sânge donator sunt amestecate cu serul pacientului (testul de compatibilitate majoră) și celulele roșii ale sângelui pacientului cu ser donor (test de compatibilitate minoră) pentru a detecta prezența reacțiilor antigen-anticorp.

Atunci când există anticorpi împotriva antigenelor minore, fie în serul pacientului, fie în cel al donorului, testul se consideră a fi pozitiv, astfel încât în majoritatea cazurilor o anumită unitate de sânge nu poate fi transfuzată.

Grupul ABO

Pentru a înțelege bine faptul că reacțiile încrucișate sunt tratate în primul rând, este necesar să cunoașteți elementele de bază despre grupurile de sânge.

În acest sens, cel mai important lucru este să știm că sângele poate fi clasificat în patru grupe: A, B, AB și O.

Fiecare dintre aceste grupuri exprimă pe suprafața celulelor roșii din sânge o anumită proteină (antigen), care este identificată ca element străin de anticorpii unui receptor potențial dintr-un grup diferit.

Cea mai izbitoare reacție antigen-anticorp în compatibilitatea sângelui este că nu este necesară o expunere prealabilă la antigen pentru a exista anticorpi. Acest lucru este cunoscut ca anticorpi naturali.

Anticorpii naturali

În general, pentru ca anticorpii să existe în corpul unui individ, este necesar ca celulele albe din sânge să fi fost expuse anterior la antigen.

Aceasta înseamnă că la primul contact între antigenul străin și organism nu există anticorpi, deoarece acestea sunt generate mai târziu, după contactul inițial. Prin urmare, este imposibil ca sistemul imunitar să aibă anticorpi împotriva unui anumit virus, dacă acesta nu a fost expus în trecut.

Singura excepție de la cele de mai sus este antigeni anti-AB. În aceste cazuri, persoana are anticorpi împotriva antigenului pe care celulele lor roșii din sânge nu le au, chiar dacă nu au fost niciodată în contact cu celulele roșii ale unei alte persoane. Acest lucru este cunoscut ca anticorpi naturali.

Antigene și anticorpi aferenți grupului sangvin

Grupele de sânge sunt determinate în cazul sistemului ABO prin prezența antigenelor specifice (A sau B) în membrana celulelor roșii din sânge și, în contrast, cu anticorpi împotriva antigenului absent în membrana eritrocitelor.

Astfel, o persoană cu grupa sanguină A exprimă antigenul A pe suprafața celulelor roșii din sânge, în timp ce în ser sunt anticorpi anti-B.

Dimpotrivă, la pacienții din grupul B, se găsește antigenul B, în timp ce anticorpii sunt anti-A.

Acum, pacienții cu sânge AB au atât antigeni A și B. Prin urmare, nu există anticorpi, deoarece astfel ar distruge celulele roșii din sânge ale acelei persoane.

Opoziția apare în grupa O, unde membrana eritrocitară nu prezintă nici unul dintre cei doi antigeni (nici A și B), în timp ce în ser sunt anticorpi anti-A și anti-B.

ABO incompatibilitate grup

Din cele de mai sus, compatibilitatea grupelor sangvine ABO poate fi cu ușurință dedusă, deoarece antigenul membranei eritrocite este anticorpi cunoscuți în mod automat în ser. Astfel:

- Sângele A este compatibil cu grupa A și cu grupa O.

- Grupul de sânge B este compatibil cu sângele B și O.

- Persoanele cu grupa O pot primi doar sânge O (deoarece au anticorpi anti-A și anti-B), deși sângele lor este primit de toate celelalte grupuri fără probleme deoarece nu are antigeni.

- În sfârșit. Cei care au grupa sanguină AB pot primi sânge din toate celelalte grupuri (A, B, O și, desigur, AB), deoarece nu au anticorpi împotriva vreunui antigen. Cu toate acestea, numai persoanele AB pot primi sânge AB, deoarece toate celelalte grupuri au anticorpi care ar distruge aceste celule roșii din sânge.

Antigenii minori

Ca și în cazul grupurilor ABO, o serie de proteine care funcționează ca antigene se găsesc pe suprafața eritrocitelor, așa cum este cazul antigienelor din grupul ABO.

Cu toate acestea, aceste antigene nu apar la toți indivizii. Combinația sa este eterogenă, iar penetrația (nivelul de exprimare al proteinei) este variabilă, prin urmare este imposibil să se clasifice în grupuri, cum ar fi cea care există pentru ABO și Rh. De acolo derivă numele său din "antigene minore", de asemenea cunoscut sub numele de "antigene cu incidență scăzută".

Deși nu sunt frecvente, pot exista anticorpi naturali împotriva antigenilor minori. Dintre acestea, cele mai frecvente sunt Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb și Kidd. Toți sunt responsabili pentru reacțiile hemolitice și post-transfuzionale foarte grave.

În plus, pot exista cazuri de sensibilizare împotriva antigenelor minore prin contactul anterior, fie cu proteinele antigenice menționate datorită transfuziilor anterioare, fie datorită imunității încrucișate.

Imunitate transversală

Se spune că există imunitate încrucișată când două antigene din două surse diferite (de exemplu o celulă roșie și o bacterie) sunt foarte asemănătoare, până la punctul în care anticorpii împotriva uneia dintre proteinele antigenice menționate reacționează și cu celălalt deoarece sunt aproape identici .

Pentru ao înțelege mai bine, luați exemplul ipotetic precedent (antigeni ai unei celule roșii și bacterii). În nici un caz nu există anticorpi naturali, dar dacă o persoană este expusă la bacterii, ei vor genera anticorpi împotriva ei.

Astfel de anticorpi vor reacționa mai târziu împotriva unei celule roșii din sânge, în cazul în care antigele din acesta sunt foarte asemănătoare cu cele ale bacteriilor care au indus formarea anticorpilor.

Dacă se întâmplă acest lucru, celulele roșii din sânge cu acea proteină antigenică specială nu pot fi administrate persoanei care are anticorpi, deoarece ar fi respingere. Aici se află importanța reacțiilor încrucișate.

Pentru ce sunt testele încrucișate?

Deoarece este imposibil să se caracterizeze sângele unor indivizi diferiți pe bază de antigeni minori, singura modalitate de a ști dacă în sângele unei persoane există anticorpi împotriva antigenelor minore ale celulelor roșii din altul este prin testele încrucișate .

În acele cazuri în care sunt prezente anticorpii, se declanșează o reacție de hemoliză sau de aglutinare, astfel încât se concluzionează că reacția a fost pozitivă; adică există anticorpi împotriva unor antigeni minori (deși nu se știe exact ce). În caz contrar, testul este negativ.

fundație

Testele încrucișate se bazează pe reacția antigen-anticorp. Prin urmare, cu ei este posibil să se detecteze dacă în serul unui receptor există anticorpi împotriva antigenelor celulelor roșii din sânge (sau invers) ale donatorului, care induc o reacție antigen-anticorp.

Dacă nu există anticorpi, nu apare nicio reacție și testul este raportat ca negativ. În schimb, dacă reacția este pozitivă (există hemoliză sau aglutinare în timpul testului), se poate concluziona că anticorpii sunt prezenți.

În acest sens, este important de reținut că pot exista anticorpi împotriva celulelor roșii din sânge atât în serul donator, cât și în cel al receptorului. Acesta este motivul pentru care există două tipuri de reacții încrucișate.

Tipuri de reacții încrucișate

Este posibil ca în serul pacientului să existe anticorpi împotriva eritrocitelor donatoare; dar contrariul poate fi, de asemenea, adevărat, adică anticorpi din serul donatorului împotriva celulelor roșii din sânge ale pacientului.

De aceea există două tipuri de teste încrucișate:

- mai mult test încrucișat.

- Testul cruce minor.

Ambele tipuri sunt efectuate în mod curent în banca de sânge înainte de transfuzarea produselor din sânge, având în vedere că, dacă oricare dintre teste este pozitiv, există un risc ridicat de reacții de transfuzie care pot pune în pericol viața pacientului.

Mai mult test încrucișat

În acest test, se evaluează dacă există anticorpi împotriva celulelor roșii din sânge ale donatorului în serul destinatarului.

Dacă se întâmplă acest lucru, produsele din sânge nu pot fi administrate, deoarece un număr mare de anticorpi prezenți în plasma pacientului vor distruge foarte rapid celulele roșii din sânge ale donatorului, generând reacții catastrofale în corpul destinatarului în acest proces. Aceste reacții sunt atât de grave încât vă pot amenința viața.

Test încrucișat minor

În acest caz, se determină dacă există anticorpi în serul donator împotriva celulelor roșii din sângele receptorului.

Dacă este așa, anticorpii vor începe să distrugă eritrocitele receptorului. Cu toate acestea, deoarece cantitatea de anticorpi este limitată, reacția are o intensitate mai mică; deși este încă periculos.

faze

Atât testele încrucișate majore cât și cele minore sunt împărțite în trei faze:

- Salina.

- Termică sau incubație.

- Coombs.

În prima fază, celulele roșii și serul sunt amestecate în soluție salină. Apoi, se adaugă albumină și proba este incubată la 37 ° C timp de 30 de minute pentru a continua în cele din urmă cu faza coombs.

tehnică

Tehnica de testare încrucișată este relativ simplă, deoarece presupune adăugarea celulelor roșii din sânge donator la serul pacientului (test încrucișat major), precum și eritrocitele recipientului în serul donatorului (teste cross-test minor).

Pentru a induce reacția antigen-anticorp într-un timp relativ scurt, trebuie urmată o serie de etape standardizate. Acești pași sunt rezumați într-o manieră simplificată de mai jos.

Este important să rețineți că în secțiunea următoare este descris testul de compatibilitate mai mare, deși etapele sunt aceleași pentru testul de compatibilitate minor, dar schimbul de origine a globulelor roșii și a serului.